液氮超低温保藏技术是将菌种保藏在-196 ℃的液态氮,或在-150 ℃的氮气中的长期保藏方法,它的原理是利用微生物在-130 ℃以下新陈代谢趋于停止而有效地保藏微生物。液氮罐厂家介绍其操作步骤如下:
1、安瓿管或冻存管的准备
用圆底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料冻存管。注意玻璃管不能有裂纹。将冻存管或安瓿管清洗干净,121 ℃下高压灭菌(15~20) min,备用。
2、保护剂的准备
保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时,应注意其浓度,一般采用10 %~20 %甘油。
3、微生物保藏物的准备(如何为微生物保藏物做准备?)
4、预冻(如何为物质做预冻处理?)
5、保藏
将安瓿管或塑料冻存管置于液氮罐中保藏。一般气相中温度为-150 ℃,液相中温度为-196℃。
6、复苏方法
液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38 ℃~40 ℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50 s~100 s。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。
*后,通过操作,根据自身实验体会,比较几种菌种保藏方法的利弊,做出*终的答案。特别提醒大家在操作时一定要注重自身安全,做好防护措施。