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预冻时一般冷冻速度控制在以每分钟下降1 ℃为好、使样品冻结到-35 ℃。液氮罐厂家小编了解到目前常用的有三种控温方法：

(1)程序控温降温法，应用电子计算机程序控制降温装置，可以稳定连续降温，能很好地控制降温速率。

(2)分段降温法：将菌体在不同温级的冰箱或液氮罐口分段降温冷却，或悬挂于冰的气雾中逐渐降温。一般采用二步控温，将安瓿管或塑料小管，先放-20 ℃至-40 ℃冰箱中(1～2) h，然后取出放入液氮罐中快速冷冻。这样冷冻速率大约每分钟下降(1～1.5) ℃。

(3)对耐低温的微生物、可以直接放入气相或液相氮中。